dry.eye-portal.ru

Иммунологические исследования слезы (обзор литературы)

Галеева Г.З²., Самойлов А.Н¹., Мусина Л.Т.¹

1 – Казанский Государственный медицинский университет
2 – Детская республиканская клиническая больница МЗ РТ, г.Казань

Анализ литературы показал, что количество публикаций, посвященных исследованиям слезной жидкости, возрастает с каждым годом (3,6,7,10,13,14).

Авторы исследуют иммунологические характеристики слезы при многих офтальмологических заболеваниях. Докторская диссертация Черных В.В. (13) посвящена исследованиям слезной жидкости при открытоугольной глаукоме.
В рамках своей работы автор определяет концентрацию ТБК-реактивных продуктов, SH-групп, уровень ЦИК, Ат к антигенам нативной и денатурированной ДНК, концентрацию лактоферрина, интерлейкинов ИЛ - 1β, ИЛ – 4 в слезе, сравнивает иммунный статус при различных стадиях открытоугольной глаукомы.

В работе Шаимовой В.А. (14) исследован иммунный статус слезы у пациентов с бактериальным кератитом. На основании данных иммунного статуса разработана клиническая классификация бактериального кератита, выделены 2 формы (первичная и вторичная) и 3 фазы течения заболевания (воспалительная, пролиферативная, реорганизации рубца и эпителизации роговицы), даны прогнозы течения бактериального кератита по уровню противовоспалительных цитокинов ИЛ - 1β и ИЛ – 8.

Имеется исследование, посвященное полному иммунному анализу слезы при различных офтальмологических заболеваниях, таких как катаракта, аномалии рефракции, дистрофии сетчатки. В данное исследование также включены люди с системной патологией почек и печени. Автор стремится упростить и сделать доступными методики обследования слезы. На основании проведенной работы он выделяет группы риска по послеоперационным воспалительным осложнениям по поводу экстракции катаракты, дает прогноз по переносимости контактной коррекции пациентами (7).

Встречаются работы, направленные на изучение кислотно-щелочного состояния конъюнктивы и роговицы при воспалительных заболеваниях глаз (6).

Однако, работы, посвященные изучению иммунологического состояния слезы при заболеваниях слезных органов, единичные. Работы, посвященные изучению иммунологического состояния слезы в детском возрасте, методики, позволяющие обследовать детей, особенно раннего возраста, отсутствуют.

Нами встречена одна работа, изучающая иммунологическое прогнозирование исхода дакриоцисториностомии на основании уровня противовоспалительных цитокинов TNF–α и IL-8 в слезной жидкости. По уровню данных цитокинов авторы дают прогноз об избыточном послеоперационном рубцевании и рецидиве заболевания (3).

Одним из наиболее распространенных и часто изучаемых параметров иммунологического статуса слезы является лизоцим.

Лизоцим относят к естественным защитным факторам организма и имеет большое значение в борьбе против инвазивности многих микробов в полости рта, верхних дыхательных путей и на слизистых глаза (2). Клинические и экспериментальные данные свидетельствуют о том, что при различных патологических процессах количество лизоцима в сыворотке крови и других биологических жидкостях колеблется в довольно широком диапазоне. Лизоцим является гликолитическим ферментом, расщепляющим полисахаридные комплексы наружных мембран бактериальных клеток (10).

Известные в настоящее время способы определения содержания лизоцима основаны на его способности лизировать клеточную стенку Micrococcus lysodekticus путем расщепления β (1→ 4) гликозидной связи между мураминовой кислотой и глюкозамином (6). Широкое распространение получили 2 метода: диффузии в агар (9,11) и турбодиметрическое определение активности лизоцима (2,4,5,10,12). Авторы стремятся создать наиболее доступную для широкого применения методику. Предложена экспресс методика (11), которая относится к диффузионным способам.

Лизоцим, в основном, определяется в сыворотке крови и в слюне, так как эти биологические жидкости легко доступны для забора (1,5,12).

Методик определения лизоцима в слезной жидкости описано меньше (10), что, вероятно, связано с определенными трудностями забора слезы.

В патенте РФ № 2115735 в рамках изобретения ранней диагностики кератоконуса описана методика определения лизоцимной активности слезы. Слезу в количестве 0.1 мл отсасывают пипеткой в нижнем своде глазного яблока, предварительно раздражая нос вдыханием паров нашатырного спирта. Из суточной агаровой культуры микрококка Micrococcus lysodekticus готовят взвесь в фосфатном буфере (pH 7.2 – 7.4).

Взвесь стантартизируют на КФК – 2 при использовании зеленого свотофильтра в кюветах по 2 мл. В опытную пробирку наливают 0.4 мл фосфатного буфера, 2 мл взвеси микрококка и 0.1 мл исследуемой слезной жидкости в разведении 1:4. В контрольную пробирку исследуемую слезную жидкость не вносят. Смесь инкубируют 30 мин при 37ºС, после чего измеряют ее оптическую плотность и определяют активность лизоцима в исследуемых образцах в мкг/л (10).

Таким образом, в настоящее время проводится немало исследований, направленных на определение иммунологических свойств слезы, как при различных офтальмологических заболеваниях, так и при общей соматической патологии организма. Предложено множество различных методик.

По данным иммунологических свойств слезы авторы предлагают диагностировать, предсказывать характер течения офтальмологических заболеваний, исход хирургических вмешательств на органе зрения. Это научное направление активно развивается в последние годы.

Список литературы:

1. Бердиев Н.Б. Определение активности лизоцима в слюне/ Н.Б.Бердиев, Л.В. Адамчук, О.Я.Рахимова//Здравоохр. Таджикистана. 1986.№3.с.102.

2. Блумберг И.А. Фотометрический метод определения лизоцима в интраназальной жидкости/И.А.Блумберг, Б.Л.Дундуре//Лаб. Дело.1987.№7.с.617-618.

3. Валиева Г.Н. О возможности иммунологического прогнозирования исхода дакриоцисториностомии/Г.Н.Валиева, Н.А.Шевчук, А.Э.Бабушкин// Офтальмоиммунология.Итоги и перспективы. Материалы научно- практической конференции 22-23 ноября 2007 года ФГУ «Московский НИИ ГБ им. Гельмгольца Росмедтехнологии».М.2007.

4. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом/ В.Г.Дорофейчук //Лаб.Дело .1968. №1. с.28-30.

5. КисельС.С. Улучшенная турбидиметрическая методика определения активности лизоцима/С.С.Кисель//Здравоохр. Белоруссии.1972.№5.с36-38.

6. Ковалевская М.А. Разработка методов экспресс диагностики и оценки динамики терапии при некоторых инфекционных заболеваниях глаз: автореферат дисс….д-ра мед.наук: 12.12.06/Ковалевская Мария Александровна.Воронеж 2006.56с.

7. Колединцев М.Н. Клинико-экспериментальная разработка системы скринингового анализа слезной жидкости для диагностики, прогноза и контроля эффективности проводимого лечения при различных формах патологии глаз: автореферат дисс….д-ра мед.наук:6.06.05/Колединцев Михаил Николаевич.м.2005.50с.

8. Мельник И.Д. Методика мазка для ориентировочного определения лизоцима в биологических жидкостях/ И.Д.Мельник.

9. Мотавкина Н.С. Микрометод количественного определения лизоцима/ Н.С.Мотавкина, Б.М.Ковалев, А.С.Шаронов//Лаб. Дело.1979. №12. с.722-723.

10. Патент РФ. Способ диагоностики кератоконуса № 2115735, опублик 20.07.1998. Авторы: Горскова Е. Н., Севостьянов Е.Н., Теплова С.Н.

11. Сухоруков А.М. Экспресс-метод определения содержания лизоцима в биологических жидкостях/ А.М.Сухоруков, Т.П.Журавлева, В.С. Цветков, Э.Г.Щербакова// Лаб. дело.1985.№7. с.419-420.

12. Стогний В.И. Способ определения активности лизоцима в слюне и сыворотке крови/В.И.Стогний, В.П. Голик, В.В.Ткаченко и др.//Лаб дело .1989.№8. с.54.

13. Черных В.В. Иммунометаболические нарушения в патогенезе первичной открытоугольной глаукомы и их коррекция: автореферат дисс….д-ра мед.наук:29.11.06/ Черных Валерий Вячеславович. Новосибирск. 2006. 40с.

14. Шаимова В.А. Бактериальный кератит.Клинико-иммунологические особенности течения, прогноза, лечения различных форм заболевания: автореферат дисс….д-ра мед.наук:7.11.07/Шаимова Венера Айратовна.Челябинск.2007. 42с.

Источник: Новые технологии в офтальмологии. Материалы Всероссийской научно-практической конференции 08 апреля 2011г., г. Казань, Республика Татарстан, Россия. Стр.100-103.

Эксклюзивный материал для публикации на портале Орган зрения www.organum-visus.com любезно предоставил Амиров Айдар Наилевич.

Примечание:
Синдром "сухого глаза", диагностика.

Внимание! Данная информация предназначена исключительно для ознакомления. Любое применение опубликованного материала возможно только после консультации со специалистом.


 Разрешается некоммерческое цитирование материалов данного раздела при условии полного указания источника заимствования: имени автора и WEB-адреcа данного раздела www.dry.eye-portal.ru, www.organum-visus.com